荧光分析(化学术语)
荧光分析法是指利用某些物质被紫外光照射后处于激发态,激发态分子经历一个碰撞及发射的去激发过程所发生的能反映出该物质特性的荧光,可以进行定性或定量分析的方法,可在固定的激发光下,在一定发射波长范围内测试荧光物质的荧光强度。由于有些物质本身不发射荧光(或荧光很弱),这就需要把不发射荧光的物质转化成能发射荧光的物质。
中文名荧光分析
化学
可以进行定性或定量分析
灵敏度更高
测定法
直接测定法
利用物质自身发射的荧光进行测定分析。
间接测定法
不管是直接测定,还是间接测定,一般的采用标准工作曲线法,取各种已知量的荧光物质,配成一系列的标准溶液,测定出这些标准溶液的荧光强度,然后给出荧光强度对标准溶液的浓度的工作曲线。在同样的仪器条件下,测定未知样品的荧光强度,然后从标准工作曲线上查出未知样品的浓度(即含量)。
一般常用的荧光分析仪器有:目测荧光仪(荧光分析灯),荧光光度计和荧光分光光度计三种。
用例
有机物质的荧光分析
有机化合物的荧光分析应用很广泛,能测定的有机物质有数百种之多,如酶和辅酶的荧光分析,农药和毒药的荧光分析,氨基酸和蛋白质的荧光分析,核酸的荧光分析。这些构成了荧光分析技术的主要内容。许多有机化合物在紫外线的照射下,所发荧光并不强或不发荧光,因此必须使用某些有机试剂,以便生成的产物在紫外线照射下能发射强的荧光。例如脂肪族有机化合物就是用间接方法测定的。
无机元素的荧光分析
在紫外线照射下能直接发射荧光的化学元素并不很多,所以对一些元素进行荧光分析时大部分采用间接测定法,这就是用有机试剂与被测定的元素组成络合物。这些络合物在紫外线照射下能发射出不同波长的荧光素,然后由荧光强度测定出该元素的含量。由于有机荧光试剂的品种繁多,用荧光分析可测定的元素有六十多种。
例如对铅的荧光分析:铅离子Pb与Cl离子组成铅氯络合物,该络合物在短波紫外光270毫微米激发下,它会发射出蓝色荧光,荧光峰值波长在480毫微米,根据荧光强度在标准工作曲线上测定出Pb的含量。该法能测定0.1~0.6微克铅/毫升。